熒光分光光度計是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。熒光分光光度計的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条、粉末)的光谱扫描。
熒光分光光度計的功能特点:
1. 荧光发射光谱
選擇某一固定波長的光激發樣品,記錄樣品中産生的熒光發射強度與發射波長間的函數關系,即得熒光發射光譜。
2. 荧光激发光谱
選定某一熒光發射波長記錄熒光發射強度作爲激發光波長的函數,即得熒光激發光譜。
3.時間分辨技術;
可用于對混合物中光譜重疊但有壽命差異的組分進行分辨並分別測量。
時間分辨熒光測定公式如下:
P(t) = P0 EXP (-t /τ)
式中P(t):擬合指數函數
P0:強度取值
EXP:指數運算符
t:時間取值
τ:熒光平均時間壽命